实验简介
Transwell侵袭实验就是用一层膜将高营养的培养液和低营养的培养液隔开，细胞放在低营养的培养液里，细胞会往高营养的培养液方向移动，但是有膜挡着，所以要穿过膜才行。应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

Transwell是细胞迁移的常用检测方法，细胞迁移 (cell migration) 也称为细胞爬行、细胞移动或细胞运动，是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一，是机体正常生长发育的生理过程，也是活细胞普遍存在的一种运动形式。

Transwell实验原理：小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。

实验步骤

1. 接种前将24孔板和Transwell小室用1×PBS浸泡5min 湿润小室。在小室中铺80µL matrigel胶，37℃培养箱中放置30min使其凝固。

2. 用胰蛋白酶消化细胞，培养基重悬细胞，调整密度1×105细胞/ml，接种到Transwell小室内，每个小室分别加0.2ml各组细胞悬液，下层加入0.7ml完全培养液(DMEM低糖培养基)，置于37℃培养箱中培养12h；

3. 培养24h后，每孔加入1ml 4%多聚甲醛溶液，室温固定15min；

4. 吸去固定液，用1×PBS洗涤2次，每孔加入1ml 0.5%结晶紫溶液，染色60min后用1×PBS洗三次，晾干；

5. 用棉签小心擦去Transwell小室上部内没有迁移的细胞，置于100×显微镜下观察。